科学研究

该成果以“Metabolites isolated from the mangrove endophytic fungus Didymella sp. CYSK-4 and their cytotoxic activities”为题发表于中科院三区《Fitoterapia》杂志上（即时IF: 3.4）。

黄槿原产于热带美洲，在中国深圳、珠海和珠江三角洲地区也有分布。黄槿的叶、树皮和花均有药用价值。根据现代药理学的研究，黄槿具有抗炎、抗氧化及抗肿瘤等多种生物活性。其内生菌代谢产物的主要活性成分为生物碱类、蒽醌类、多取代苯类和三萜类等。前期从广东湛江红树林国家级自然保护区的黄槿叶子中分离出内生真菌Didymella sp. CYSK-4。对该真菌进行发酵培养，分离得到2个新的大环生物碱ascomylactam D、E（1-2）以及一对新的对映异构体Didymetone (±) 3，通过NMR和HRESIMS确定化合物结构并结合ECD计算和X-ray的方法确定其绝对构型。采用MTT法，在HELA, A549, KYSE 150, PC-3和 SW620 5种人类癌细胞株上对ascomylactam D、E进行细胞毒活性的筛选，结果表明化合物2对人A549和KYSE 150癌细胞具有显著的细胞毒性，IC₅₀值分别为2.8 μM和5.9 μM。

Fig. 1 Chemical structures of compounds 1−3

Fig. 2 The correlations of ¹H-¹H COSY and HMBC of compound 1-3.

Fig. 3 Key NOE correlations of compounds 1−2.

Fig. 4 X-ray crystallographic analysis of 1

Fig. 5 Experimental and calculated ECD spectra of compound 2 in MeOH.

Fig. 6 Comparisons of calculated and experimental ¹³C NMR data of 3.

Fig. 7 Experimental CD spectra of compound (+)-3 and (‒)-3 in MeOH.

Table 3. Cytotoxicity data for Compounds 1-2 (IC₅₀, μM)

^aPositive control. ^bHuman lung cancer cell line. ^cHuman cervical cancer cell line. ^dHuman esophageal squamous cell line. ^eHuman prostatic cancer cell line. ^fHuman colon cancer cell line.

Conclusion

从红树林内生真菌Didymella sp. CYSK-4发酵中获得了两个新的大环生物碱ascomylactam D-E (1-2)和一对新的对映体(+)-和(-)- didymeone (3)。化合物1-2对人类癌细胞HELA、A549、KYSE 150、PC-3和SW620的细胞毒性进行了评价。化合物2对人A549和KYSE 150癌细胞具有显著的细胞毒性，IC₅₀值分别为2.8 μM和5.9 μM。该实验丰富了decahydrofluorene的结构类型，有助于该类化合物抗肿瘤活性的研究，探索其作为抗癌药物先导化合物的潜力。同时，它反映了红树林天然产物的化学多样性，也有助于红树林的开发、利用和保护。